本文作者:nihdff

基因工程限制酶切割质粒计算:限制酶切质粒一次几个切口?

nihdff 2023-12-23 52
基因工程限制酶切割质粒计算:限制酶切质粒一次几个切口?摘要: 今天给各位分享基因工程限制酶切割质粒计算的知识,其中也会对限制酶切质粒一次几个切口进行解释,如果能碰巧解决你现在面临的问题,别忘了关注本站,现在开始吧!本文目录一览:1、高中生物...

今天给各位分享基因工程限制酶切割质粒计算的知识,其中也会对限制酶切质粒一次几个切口进行解释,如果能碰巧解决你现在面临的问题,别忘了关注本站,现在开始吧!

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高中生物,基因工程,回答一下下面的问题?

1、而X-4是在E2的切口处插入了Tcr基因,没有用到E2,所以E2处不会断裂,不符合题意,所以X-4不增加

2、如果用两种相同的酶切割,所得产物就复杂了,不仅仅有以上产物,还有质粒自身的环化,目的基因自身的环化,且不可控制插入目的基因在质粒中的方向。

基因工程限制酶切割质粒计算:限制酶切质粒一次几个切口?
图片来源网络,侵删)

3、给出的DNA分子的碱基序列,一般都是上面一条链是5ˊ→3ˊ方向,下面一条链是3ˊ→5ˊ方向。

基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。已...

1、所以质粒只能由酶I酶切。如果目的基因用酶I处理,那么目的基因与质粒只有一段能够相连(目的基因的左边被酶I切割形成粘性末端,质粒gene I区被酶I切割成粘性末端。但是目的基因的右端不能被酶切,所以不能与质粒相连)。

2、(1)酶:限制性核酸内切酶、DNA连接酶、(2)载体:质粒载体、噬菌体载体、Ti质粒、人工染色体 提取目的基因 获取目的基因是实施基因工程的第一步。

基因工程限制酶切割质粒计算:限制酶切质粒一次几个切口?
(图片来源网络,侵删)

3、目的基因的切割:①选取的限制酶,其识别序列不可出现在目的基因内部,否则会破坏目的基因。②为了避免目的基因自身环化(目的基因的两端被连接成环),一般切割目的基因时选取目的基因两侧产生不同末端的限制酶。

4、但在进行基因工程的操作过程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC— ,限制酶II的识别序列和切点是—↓GATC—,据图(1)过程①表示的是采取 的方法来获取目的基因。

5、步骤:⑴用一定的限制酶切割质粒,使之出现一个黏性末端切口。⑵用同种限制酶切割目的基因,产生相同的黏性末端。⑶将目的基因片段插入质粒切口,加入适量DNA连接酶,使目的基因与质粒形成重组质粒。

基因工程限制酶切割质粒计算:限制酶切质粒一次几个切口?
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基因工程中使用的限制酶其特点

【答案】:Ⅰ类限制性内切核酸酶的分子质量较大,一般在300kDa以上,通常由三个不同的亚基所组成。

限制酶是识别特定的核苷酸序列,并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶。根据酶的功能特性、大小及反应时所需的辅助因子,限制性内切酶可分为两大类,即I类酶和Ⅱ酶。

限制酶的作用特点。限制酶的作用部位。基因工程中限制酶的作用。限制酶的作用底物。限制酶用于DNA基因组物理图谱的组建。基因的定位和基因分离。DNA分子碱基序列分析。比较相关的DNA分子和遗传工程。

请问基因工程里限制酶切质粒需要切几次?

1、质粒一刀 如果三刀都用同种限制酶,就能形成相同的粘性末端,可以互补配对并在DNA连接酶的催化下拼接成功。

2、取下一段目的基因要切两次,也就是说这里切的两次可以分两种不同的酶来切,同样的,载体也需要切两次同样也是用这两种酶来切,这样有两组碱基的互补配对,就可以避免载体和载体配对以及目的基因和目的基因配对。

3、你需要获得特定性状的目的基因就是只选取一段DNA,那么这一段DNA两端各需要一种限制酶来进行酶切,所以需要切两个切口;同时每个切口是形成两个黏性末端,所以一共四个黏性末端。

4、防止环状质粒发生自连现象;而如果要在质粒上插入目的基因,酶切位点就必须与质粒切开的位点处是相同的,否则无法将两者进行连接。酶切过程可以是一种酶先切,另一种酶再切;也可以两种酶同时对质粒酶切,通常影响不大。

5、你仔细看一下质粒,若用酶2切,那质粒两处酶切位点都要断,所以质粒只能用酶1切,保证其只有一个缺口。然后目的基因则只能用酶2切,这样两端才都能切下来。(若用酶1的话目的基因右端是切不了的)希望能帮到你。

6、基因表达载体的构建(即目的基因与运载体结合)是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。将目的基因与运载体结合的过程,实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。

泳道的片段数和限制酶切点数的关系

1、第三条泳道,双酶切的DNA片段,这个是经双酶后的大片段,应该是7338-1200=6138bp这个片段,它跑的没有原始质粒快,并且在最前面还有一条淡淡的1200bp的片段,这说明已经把这个质粒给切好了。

2、限制酶会在DNA上找特定的一段碱基序列(例:EcoR I 会找 -GAATTC- 这样一段碱基),如果找到了,限制酶会从这一段碱基中间切开(例:EcoR I 会把 -GAATTC- 切成 -GAA/ /TTC- )。这样,基因就被切成2段了。

3、通常DNA上存在大量的限制性内切酶酶切位点。因此,源限制性内切酶能将很长的DNA分子酶解成许多长短不一的小片段,片段的数目和长度反映了DNA分子上限制性酶切位点的分布。

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