本文作者:nihdff

基因工程切割酶选择原理:切割目的基因的酶?

nihdff 01-22 47
基因工程切割酶选择原理:切割目的基因的酶?摘要: 今天给各位分享基因工程切割酶选择原理的知识,其中也会对切割目的基因的酶进行解释,如果能碰巧解决你现在面临的问题,别忘了关注本站,现在开始吧!本文目录一览:1、基因工程中用限制酶切...

今天给各位分享基因工程切割选择原理的知识,其中也会对切割目的基因的酶进行解释,如果能碰巧解决你现在面临的问题,别忘了关注本站,现在开始吧!

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基因工程中用限制酶切割质粒,是切断而已,没有切除掉一小片段吧?_百度...

1、如果这个质粒上这两个酶的酶切位点各有一个的话,是的。

2、用限制酶2 酶切割目的基因是因为目的基因左边是GGATCC,右边是GATC。切割目的基因是为了把目的基因切断,而不是把目的基因切开。如果用酶1切的话,只能切开目的基因的一处,而要把目的基因切断就要切两处。

基因工程切割酶选择原理:切割目的基因的酶?
图片来源网络,侵删)

3、如:用EcoR I(一种识别GAATTC的内切酶)同时处理质粒和基因的话。第一个要注意的地方就是,无论是质粒还是基因两端的粘性末端是完全相同的,也就意味着基因掉过来连接也是能连上的。

4、基因工程中的构建基因表达载体需用到限制酶和DNA连接酶,限制酶会识别限制酶切割位点(即某个DNA序列,如AACC--TTGG,当然,不同的限制酶作用位点不一),限制酶能将磷酸二酯键切断,不是随便切断,而是特定的。

5、提质粒的目的是去除 RNA,将质粒与细菌基因组 DNA分开,去除蛋白质及其它杂质,以得到相对纯净的质粒。酶切的目的是对粘末端的DNA分子和载体分子进行切割,以获得相应的粘末端连接。酶切可以是单酶切也可以是双酶切。

基因工程切割酶选择原理:切割目的基因的酶?
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基因工程中切割载体和含目的基因的DNA片段是需使用同种限制酶是为什么...

1、因为限制性内切酶的识别位点是固定的,所以我们可以在质粒和目的基因上人为的引入同样的序列,这样就能保证他们可以被同种酶切断了。

2、用同种限制酶说明质粒里面也有和目的基因一样的基因这样说是不正确的。限制酶识别的是碱基对序列的顺序而不是“基因种类”。

3、如果目的基因的两端都有限制酶1的切点,你可以只用一种限制酶1切割,这样目的基因两侧的末端相同,会出现目的基因环化(首尾连接),这不利于目的基因和运载体质粒结合。

基因工程切割酶选择原理:切割目的基因的酶?
(图片来源网络,侵删)

4、没错,只有用同一种酶处理,载体和目的基因两端才会形成相同的粘性末端,才能把两者连起来。

为什么要两种酶才能切割基因(两端要不同的限制酶),不能是同一种吗...

为了防止目的基因和运载体自身环化。为保证目的基因正序插入运载体,防止反向连接。限制性核酸内切酶是可以识别并附着特定的脱氧核苷酸序列,并对每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶。

目的基因的两端都要和质粒末端相匹配,切目的基因的限制酶也是那一个,就是一种限制酶。如果用两个限制酶切质粒的话,目的片段的两端分别是2种相匹配的,需要用2种限制酶切。就是总共2种限制酶。不存在标题的情况。

识别序列有区别--G↓GATCC--限制酶1,2都可以切,但是--↓GATC--只能有酶2切。懂了么,就是说酶一要识别出6个碱基这样的排序才能切,但是酶二只需要识别出4个这样的排序,酶二的选择性比较低。

一般情况下是的,因为只有这样才能有相同的黏性末端,目的基因和运载体才能重组。但也有两种不同的内切酶产生相同的黏性末端如G↓ATTCG 和↓ATTC。

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