摘要：
今天给各位分享基因工程如何在质粒上切割的知识，其中也会对基因工程中质粒的作用进行解释，如果能碰巧解决你现在面临的问题，别忘了关注本站，现在开始吧！本文目录一览：1、请问基因工程里... 今天给各位分享基因工程如何在质粒上切割的知识，其中也会对基因工程中质粒的作用进行解释，如果能碰巧解决你现在面临的问题，别忘了关注本站，现在开始吧！
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请问基因工程里限制酶切质粒需要切几次?
实际操作中，由于种种条件限制，往往需要用到两种限制酶识别两种切割位点，所以是各切两次。不管怎么切，保证切完后目的基因两端的识别位点和质粒切口两端相同即可。
质粒一刀 如果三刀都用同种限制酶，就能形成相同的粘性末端，可以互补配对并在DNA连接酶的催化下拼接成功。
取下一段目的基因要切两次，也就是说这里切的两次可以分两种不同的酶来切，同样的，载体也需要切两次同样也是用这两种酶来切，这样有两组碱基的互补配对，就可以避免载体和载体配对以及目的基因和目的基因配对。
防止环状质粒发生自连现象；而如果要在质粒上插入目的基因，酶切位点就必须与质粒切开的位点处是相同的，否则无法将两者进行连接。酶切过程可以是一种酶先切，另一种酶再切；也可以两种酶同时对质粒酶切，通常影响不大。
你需要获得特定性状的目的基因就是只选取一段DNA，那么这一段DNA两端各需要一种限制酶来进行酶切，所以需要切两个切口；同时每个切口是形成两个黏性末端，所以一共四个黏性末端。
最理想的状况是能找到一种酶切位点，在目的基因的两侧都出现、但在目的基因内部不出现，这时候就可以用同一种酶同时切割两个位点、剪下来一段DNA片段。
基因工程酶切位点
一般所说的酶切位点。就是限制性内切酶所能切开的DNA序列，基因工程中所用的限制性内切酶位点大多都是专一性的，只能识别某特定序列，并且在该序列的特定部位切开。酶切位点有些基因里面有，有些基因里面没有，不一定的。
除了防止自连，保证插入片段方向性之外，插入片段内部通常含有某些酶切位点，所以为了保证所用的内切酶不会作用于插入片段本身，需要根据实际需要适用不同的内切酶。
做为具有使用性的载体做为具有使用性的载体，一般最少有2个以上不同的限制性酶切位点，这样能够保证需要插入片段的效率和插入的片段插入的方向性。
高中生物,切割目的基因和切割质粒要分别注意什么,以及分别所具备的原...
目的基因和质粒要[同时]用同一种限制性核酸内切酶切割，不然就没法连了。但最好用不同的限制酶切两端（切目的基因是不是应该切两下么），防止载体自连或目的基因自连。啊啊，这道题。
在目的基因和载体细胞连接前，对目的基因需要切两刀，载体需要切一刀或者两刀。如果目的基因两端粘性末端相同，载体切一刀就可以，否则切两刀。
反转录法 .。注意表达载体构建时 必须有：启动子、终止子、目的基因、标记基因。该质粒上有1个康氨苄青霉素基因和1个四环素抗性基因，二者均可作为标记基因，同时这两个位点分别是限制酶I、限制酶II的位切点。
求文件： 高中生物选修3DNA重组技术的基本工具 限制性核酸内切酶（简称限制酶）：用于切割载体和目的基因，有专一性，只可形成一种粘性末端。
基因工程中，限制酶的切割位点主要取决于限制酶能识别的特定的碱基序列。限制酶一般用于切割含目的基因的DNA片段和切割质粒。
纸条中某一段表示目的基因，要取下来，左右各需剪一刀，所以获取目的基因需要切两刀。不是载体细胞，而是运载体。常用的质粒，是一个环状DNA分子，只需要剪一刀，形成一个切口，把目的基因插入即可。
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